1500年4月，在米兰的王室贵族中声名显赫的达·芬奇回到故乡佛罗伦萨。
当时的贵妇人都以让达·芬奇绘制肖像画为荣耀，因为他是画家中能使人的肖像看上去既栩栩如生，又美丽漂亮的高手。也因为他那挑剔的画笔，很少有人能够得到如此殊荣。为了往自己的脸上“贴金”，佛罗伦萨著名银行家佐贡多邀请达·芬奇给他年轻的妻子蒙娜丽莎画像。
佐贡多中年秃顶，他的夫人却是国色天香。达·芬奇第一眼见到蒙娜丽莎的时候，心便怦怦直跳。这是他见过的最美的女子，也正是他想要描绘的那种女子——没有丝毫庸俗的脂粉气，全身充满着纯真和天然的情趣，脸颊绯红，略带羞涩，一绺绺鬈发披散在裸露的颈上，身姿丰满而美妙。
达·芬奇简直为蒙娜丽莎的美貌惊呆了，以至于佐贡多提出请求的时候，他半天才缓过神来，有些局促地说：“我同意工作，不过，因为画这幅画得要点背景和气氛，最好在我的画室进行。”
蒙娜丽莎就这样来到了达·芬奇的画室。刚开始，她感到很不自在，坐在那儿不能动弹不说，还有一双陌生人的眼睛老是盯着自己，这是多么难受的事。看着蒙娜丽莎紧蹙的双眉，达·芬奇马上意识到，要想办法让她放松，让她开心，让她展现出最自然的美来。
达·芬奇请来魔术师为她表演魔术，请来钢琴家为她弹奏美妙的音乐，请来丑角为她说笑逗乐……这一切好像都无济于事，根本提不起她的兴致，她不时地打着哈欠。对蒙娜丽莎的反应，大师不着急也不气馁，他一边情绪饱满地工作，一边细心地观察她的内心世界。渐渐地，达·芬奇发现她对画室里的动物标本和实验仪器很感兴趣，那是她从未见过的东西。那些也是达·芬奇最醉心的，他不仅有着惊人的绘画天赋，对科学和实验也痴迷得难以自拔。
这一发现让达·芬奇很兴奋，他决定把他研究的事物讲给她听，把她带入全新的世界，唤醒她昏昏欲睡的灵魂。中间休息时，蒙娜丽莎看见一幅水鸟爪子的速写，她好奇地问：“先生，这是什么呀？”他便向她讲述游泳和飞行的原理，给她讲游泳器官和飞行器官的相似之处，他还给她讲了，这种相似怎样使他联想到一种飞行机械。她饶有兴趣地听着，眼里闪现出新奇的火花。见到这眼中的火花，达·芬奇的心震颤着，既高兴又激动。于是，只要休息时，他就把他对大自然的那些考察和他制作出来的东西讲给她听，指给她看。蒙娜丽莎入迷了，她爱上了这个博学多才、英俊潇洒的奇男子，脸上荡漾着幸福的微笑。他迅速地画起来。可惜那幸福的微笑，很快就消失了。
达·芬奇爱上了银行家的妻子，这是他活到四十多岁的第一次恋爱。当蒙娜丽莎不能来画室的时候，他的心总是空落落的，感觉生活里缺少了什么。也许就因为这个原因，他把完成订货的时间拖得很长很长，整整用了4年。他用自己独特的方式爱她，他要把她因爱而动人的一刹那的微笑画作永久的纪念。
这幅画改变了蒙娜丽莎的命运。她由一个庸俗的贵族妇女，重返天真无邪的少女时代。她默默地爱上达·芬奇，但她不敢表达，更不敢有丝毫的表示。巨大的痛苦压抑着她，使她不到30岁的时候，竟为爱情忧郁而逝。达·芬奇也永远地爱着她，终身未娶。
往事如烟，那些美好的日子早已随风而逝，却是留在达·芬奇脑海中的珍贵回忆。回忆给她作画的日子，回忆使她开心微笑的日子！多少年来，这美丽的微笑始终伴随着他，一刻也不曾离开，他也绝不允许任何人把它夺走。
达·芬奇让学生把他画架上的绸布揭去。灰尘飘洒，展现在他眼前的是永久的微笑。他举着灯，蹒跚地在画前走着，看着，泪流满面。第二年，也就是1519年5月2日，他在心爱的人的微笑中溘然长逝。
五百多年来，上至国王总统，下至平民百姓，不知有多少人钟情于蒙娜丽莎，都只为她那神秘的微笑。许多专家学者对她的微笑进行研究，现代人甚至用计算机情绪识别软件来破解她微笑背后的奥秘。其实，在所有的猜测中，或许爱才是最好的答案，因为世间唯有爱情才能浇灌出如此美丽的花朵。